2012-1114
2012-117
1、化凍將血清（FetalBovineSerum，Hyclone）從－20℃冰箱取出，放于4℃冰箱化凍過夜；也可室溫（或浸于自來水中）化凍，化凍后若不馬上滅活，可以放入4℃冰箱暫時保存；2、滅活①放入室溫的水浴鍋內開始加熱（同時放入一個內裝200ml自來水的血清瓶，插入一根溫度計，溫度監控以此為準）；②當溫度計顯示56℃時，控制在此溫度30分鐘±3分鐘；若不小心使溫度上升超過56℃，則：若仍未超過60℃，且時間很短（比如：不超過5分鐘），則仍可使用；若超過60℃...
查看更多2012-112
1、凍存條件：建議采用40-50%FBS+8%-10%DMSO+該細胞株無血清培養基2、凍存方法：①梯度凍存：4℃——1h；-20℃——30min；-80℃——過夜②使用凍存盒：直接放入-80℃冰箱中過夜（有些細胞不適應此種方法）3、復蘇方法：①打開水浴，將培養基放入水浴中，待其穩定至37℃；②細胞從液氮內取出后，應快速將細胞放于37℃水浴中，輕輕振搖，使其溶化，（盡量避免溶化前凍存管脫離水浴）；③將溶化后將細胞凍存懸液離心，轉速1000rpm，3min,后棄去上清，使細胞重...
查看更多2012-1026
細胞生長要求嚴格的無毒無污染環境，因此必須注意培養室的清潔衛生，保持操作空間的無菌條件。1、培養室應為獨立、封閉的空間。培養室及緩沖間都應保持整潔，不要隨意出入；2、保持超凈工作臺的無菌環境，每次使用前打開紫外燈照射消毒15—30分鐘；每次使用后將廢棄物清理干凈，各用具規放整齊，用70%酒精擦凈臺面，再打開紫外燈照射30分鐘以上；3、定期擦洗桌面、地板、清潔培養室，并用0.1%的新潔爾滅溶液消毒；定期打開培養室的大紫外燈，將整個房間進行照射消毒；4、每次打開培養箱前，或手伸入...
查看更多2012-1024
一、康寧Corning1、標準TC處理：培養瓶、培養板、培養皿為大氣下等離子體處理，滾瓶和培養管為真空等離子體處理，處理的表面帶負電，增加氧原子含量。2、CellBIND處理：是指微波等離子處理，處理效果更好，更親水。二、BD1、BDFalcon處理：為真空等離子處理。2、BDPrimaria處理：為真空等離子體加入氧氣和氨氣混合氣體處理，使表面有含氧和含氮基團。三、Nunc：表面處理專家1、PolySorp：對疏水性分子具有高親和力。2、MediSorp：化學性介于Poly...
查看更多2012-1022
一、細胞系（CellLine）原代培養舞經傳代成功即成細胞系,由原先存在于原代培養物中的細胞世系（LineageofCells）所組成。二、細胞株（CellStrain）通過選擇法或克隆形成法從原代培養物或細胞系中獲得具有特殊性質或標志物稱為細胞株。細胞株的特殊性質或標志必須在整個培養期間始終存在。如果不能繼續傳代或傳代數有限,稱為有限細胞株（finitecellstrain）;如果可以連續傳代,稱為連續細胞株（continuouscellstrain）。對于人類腫瘤細胞,在...
查看更多2012-1018
2012-1016
一、培養用液1、未滅菌的試劑：高壓或過濾除菌。2、物品儲放區不潔：經常清潔并作滅菌處理。3、消毒過程不標準：檢查高壓滅菌器是否工作正常；過濾后檢查濾膜是否破裂；滅菌后的液體仍需做無菌試驗。4、一次性無菌用品不合格：進行質量檢測或更換供應商。二、取材1、原代組織來源有污染，不要把動物帶入培養室處理；2、可能有污染的組織應在酒精中浸泡30s－1min，在清洗用的PBS中加入抗生素。三、玻璃器皿1、儲存時灰塵或細菌孢子進入－一消毒后的器皿應嚴密包裹，置于無菌物品放置區；未包裹物品放...
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