更新時間:2012-11-02
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1、凍存條件:建議采用40-50%FBS+8%-10%DMSO+該細胞株無血清培養基
2、凍存方法:
①梯度凍存:4℃——1h;-20℃——30min;-80℃——過夜
②使用凍存盒:直接放入-80℃冰箱中過夜(有些細胞不適應此種方法)
3、復蘇方法:
①打開水浴,將培養基放入水浴中,待其穩定至37℃;
②細胞從液氮內取出后,應快速將細胞放于37℃水浴中,輕輕振搖,使其溶化,(盡量避免溶化前凍存管脫離水浴);
③將溶化后將細胞凍存懸液離心,轉速1000rpm,3min,后棄去上清,使細胞重懸在新鮮培養液中,進行培養;
④細胞在培養箱中貼壁24h后,更換新鮮培養基,待其長滿,進行傳代。
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